"MOLgen DNA Mycoplasma hominis S1 Kit" ist ein Assay-Kit für den Nachweis von Mycoplasma hominis DNA mittels Real-Time PCR-Methode.
Einführung
der "MOLgen DNA Mycoplasma hominis S1 Kit" ist für den Nachweis von Mycoplasma hominis DNA bestimmt, die mit dem "MOLgen Universal Extraction Kit" aus klinischen Proben isoliert wurde.
Der Assay basiert auf der Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit Fluoreszenzdetektion des amplifizierten Produkts.
Der Kit enthält Reagenzien, die für 96 Tests, einschließlich Kontrollproben, benötigt werden.
Der Kit ist für die Verwendung mit dem iQ5 iCycler (Bio-Rad, USA), CFX96 (Bio-Rad, USA) und DT-96 (DNA-Technology, Russland) validiert.
der "MOLgen DNA Mycoplasma hominis S1 Kit" ist für die Analyse von klinischem Material (Speichel, Urin, Epithelzellenabschnitte) bestimmt.
Prinzip der Methode
Die Echtzeit-PCR basiert auf dem Nachweis der von einem Reportermolekül erzeugten Fluoreszenz, die mit dem Fortschreiten der Reaktion zunimmt. Das Reportermolekül ist eine doppelt markierte DNA-Sonde, die spezifisch an die Zielregion der Erreger-DNA bindet. Das Fluoreszenzsignal erhöht sich aufgrund der Trennung von Fluoreszenzfarbstoff und Quencher durch die Aktivität der Taq-DNA-Polymerase-Exonuklease während der Amplifikation. Die PCR besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA, Primer-Annealing und Synthese der komplementären Kette.
Der Zyklusschwellenwert (Ct) ist eine Zykluszahl, bei der die in einer Reaktion erzeugte Fluoreszenz den Schwellenwert überschreitet und das Fluoreszenzsignal deutlich über den Hintergrund ansteigt. Das erhöhte Signal ist auf die Verwendung einer DNA-Hybridisierungssonde zurückzuführen, die für die gegebene DNA-Sequenz spezifisch ist: Sie bindet im Verlauf der Reaktion an einen der DNA-Stränge und sorgt für zusätzliche Spezifität der Methode.
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