"Molgen DNA HPV 35/45 S1 Kit" ist ein Assay-Kit für die differenzierte Bestimmung der humanen Papillomavirus-Typen 35 und 45 DNA mittels real-time PCR-Methode.
Einführung
der "Molgen DNA HPV 35/45 S1 Kit" wurde für die differenzierte Bestimmung der DNA der humanen Papillomavirus (HPV) Typen 35 und 45 entwickelt, die aus klinischen Proben unter Verwendung des Extraktionskits "Molgen Universal Extraction Kit" isoliert wurden. Der Assay basiert auf der Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit Fluoreszenzdetektion des amplifizierten Produkts.
Der Kit enthält Reagenzien, die für 96 Tests, einschließlich Kontrollproben, benötigt werden.
Der Kit ist für die Verwendung mit dem iQ iCycler, iQ5 iCycler (Bio-Rad, USA) validiert. Der Kit ist mit anderen Echtzeit-PCR-Systemen wie CFX96 (Bio-Rad, USA) und DT-96 (DNA-Technology, Russland) kompatibel.
der "Molgen DNA HPV 35/45 S1 Kit" ist für die Analyse von klinischem Material (Epithelzellen, Sperma, Prostatasaft, Urin) bestimmt.
Prinzip der Methode
Die Echtzeit-PCR basiert auf dem Nachweis der Fluoreszenz, die von einem Reportermolekül erzeugt wird und mit dem Fortschreiten der Reaktion zunimmt. Das Reportermolekül ist eine doppelt markierte DNA-Sonde, die spezifisch an die Zielregion der Erreger-DNA bindet. Das Fluoreszenzsignal nimmt zu, da der Fluoreszenzfarbstoff und der Quencher durch die Exonukleaseaktivität der Taq-DNA-Polymerase während der Amplifikation getrennt werden. Der PCR-Prozess besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA, Primer-Annealing und Synthese der komplementären Kette.
Der Zyklusschwellenwert - Ct - ist die Zykluszahl, bei der die in einer Reaktion erzeugte Fluoreszenz die Fluoreszenzschwelle überschreitet, d. h. das Fluoreszenzsignal steigt deutlich über die Hintergrundfluoreszenz an.
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