Das Reagenzienkit ist für den Nachweis von Humaner Papillomavirus (HPV)-DNA der Typen 26 und 51 in klinischen Proben mittels Echtzeit-PCR bestimmt. Die Kits enthalten nur Reagenzien für die Echtzeit-PCR.
Einführung
das "MOLgen DNA HPV 26/51 S1 Kit" ist für den differenzierten Nachweis von DNA des humanen Papillomavirus (HPV) der Typen 26 und 51 in klinischen Proben (Epithelzellenabstriche) mittels Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit Fluoreszenzdetektion des amplifizierten Produkts bestimmt.
Die Extraktion von DNA aus klinischen Proben kann mit dem "Molgen Universal Extraction Kit" durchgeführt werden; bei Verwendung von NA-Extraktionskits anderer Hersteller wird dringend empfohlen, eine von Adaltis S.r.l. hergestellte interne Kontrollprobe (IC) zu verwenden.
Die Ergebnisse der PCR-Analyse werden bei der komplexen Diagnostik von Krankheiten berücksichtigt.
Set 1 ist für die Verwendung mit Block-PCR-Cyclern bestimmt: AMPLIlab (Adaltis), iQ5 iCycler, CFX96 (Bio-Rad, USA), DT-96 (DNA-Technology, Russland).
Set 1 enthält die erforderlichen Reagenzien für 96 Tests, einschließlich Kontrollproben.
Prinzip der Methode
Die Echtzeit-PCR basiert auf dem Nachweis der von einem Reportermolekül erzeugten Fluoreszenz, die mit dem Fortschreiten der Reaktion zunimmt. Das Reportermolekül ist eine zweifach markierte DNA-Sonde, die sich spezifisch an die Zielregion der Erreger-DNA bindet. Das Fluoreszenzsignal erhöht sich aufgrund der Trennung von Fluoreszenzfarbstoff und Quencher durch die Aktivität der Taq-DNA-Polymerase-Exonuklease während der Amplifikation. Die PCR besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA, Primer-Annealing und Synthese der komplementären Kette
hreshold cycle value (Ct) ist die Zykluszahl, bei der die in einer Reaktion erzeugte Fluoreszenz den Schwellenwert überschreitet
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