das "MOLgen RNA TBEV S1 Kit" ist ein Assay-Kit für den Nachweis von Zeckenenzephalitis-Virus-RNA mittels Echtzeit-PCR.
Einführung
der "MOLgen RNA TBEV S1 Kit" ist für den Nachweis der RNA des Zeckenenzephalitis-Virus (FSME) mittels reverser Transkription der viralen RNA und Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) mit Fluoreszenznachweis des amplifizierten Produkts bestimmt.
Die Extraktion von RNA aus klinischen Proben (Vollblut, Serum (Plasma), Leukozytenblutfraktion, Liquor, Biopsiematerial und Zeckensuspensionen) kann mit dem "Molgen Universal Extraction Kit" durchgeführt werden. Bei Verwendung von NA-Extraktionskits anderer Hersteller wird dringend empfohlen, eine von Adaltis hergestellte interne Kontrollprobe (IC) zu verwenden.
Die Ergebnisse der PCR-Analyse werden bei der komplexen Diagnostik von Krankheiten berücksichtigt.
Set 1 ist für die Verwendung mit Block-PCR-Cyclern validiert: iQ5 iCycler, CFX96 (Bio-Rad, USA), DT-96 (DNA-Technology, Russland).
Set 1 enthält Reagenzien für 48 Tests, einschließlich Kontrollproben.
Prinzip der Methode
Die Echtzeit-PCR basiert auf dem Nachweis der von einem Reportermolekül erzeugten Fluoreszenz, die mit dem Fortschreiten der Reaktion zunimmt. Das Reportermolekül ist eine zweifach markierte DNA-Sonde, die sich spezifisch an die Zielregion der Erreger-DNA bindet. Das Fluoreszenzsignal erhöht sich aufgrund der Trennung von Fluoreszenzfarbstoff und Quencher durch die Aktivität der Taq-DNA-Polymerase-Exonuklease während der Amplifikation. Die PCR besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA, Primer-Annealing und Synthese der komplementären Kette.
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