"Molgen DNA VZV S1 Kit" ist ein Assay-Kit für den Nachweis von Varizella-Zoster-Virus-DNA mittels real-time PCR.
Einführung
der "Molgen DNA VZV S1 Kit" ist für den Nachweis von Varicella-Zoster-Virus-DNA nach der Methode der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) in Echtzeit mit Fluoreszenzdetektion des amplifizierten Produkts bestimmt.
Set 1 ist für die Verwendung mit iQ5 iCycler (Bio-Rad, USA), CFX96 (Bio-Rad, USA) und DT-96 (DNA-Technology, Russland) bestimmt.
Die Extraktion von DNA aus klinischen Proben (Abstriche von Epithelzellen und Gewebeflüssigkeiten von erosiv-ulzerativen Hautläsionen und menschlicher Schleimhaut, Urin, Speichel, Blutserum (Plasma)) kann mit dem "Molgen Universal Extraction Kit" durchgeführt werden.
Set 1 enthält die erforderlichen Reagenzien für 48 Tests, einschließlich Kontrollproben.
Prinzip der Methode
Die Echtzeit-PCR basiert auf dem Nachweis der von einem Reportermolekül erzeugten Fluoreszenz, die mit dem Fortschreiten der Reaktion zunimmt. Das Reportermolekül ist eine zweifach markierte DNA-Sonde, die sich spezifisch an die Zielregion der Erreger-DNA bindet. Das Fluoreszenzsignal erhöht sich aufgrund der Trennung von Fluoreszenzfarbstoff und Quencher durch die Aktivität der Taq-DNA-Polymerase-Exonuklease während der Amplifikation. Die PCR besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA, Primer-Annealing und Synthese der komplementären Kette.
Der Zyklusschwellenwert (Ct) ist eine Zykluszahl, bei der die in einer Reaktion erzeugte Fluoreszenz den Schwellenwert überschreitet und das Fluoreszenzsignal deutlich über den Hintergrund ansteigt. Das erhöhte Signal ist auf die Verwendung einer DNA-Hybridisierungssonde zurückzuführen, die für die gegebene DNA-Sequenz spezifisch ist: Sie bindet im Verlauf der Reaktion an einen der DNA-Stränge
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