das "MOLgen DNA HSV-1 / HSV-2 S1 Kit" ist ein Assay-Kit zur differenziellen Bestimmung von Herpes Simplex Virus Typ 1 und 2 DNA mittels Real-Time PCR Methode.
Einführung
das "MOLgen DNA HSV-1 / HSV-2 S1 Kit" ist ein Assay-Kit für die differenzierte Bestimmung von Herpes Simplex Virus Typ 1 und 2 DNA, die aus klinischen Proben mittels Extraktionskit isoliert wurde: "MOLgen Universal Extraction Kit". Der Assay basiert auf der Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit Fluoreszenzdetektion des amplifizierten Produkts.
Der Kit enthält Reagenzien, die für 96 Tests, einschließlich Kontrollproben, benötigt werden.
Der Kit ist für die Verwendung mit iQ5 iCycler (Bio-Rad, USA), CFX96 (Bio-Rad, USA) und DT-96 (DNA-Technology Research and Production Company, Russland) konzipiert.
das "MOLgen DNA HSV-1 / HSV-2 S1 Kit" ist für die Analyse von klinischem Material (Epithelzellen, Speichel, Sperma, Prostataflüssigkeit, Urin, Serum, Plasma, Leukozytenmasse, Vollblut) bestimmt.
Prinzip der Methode
Die Echtzeit-PCR basiert auf dem Nachweis der Fluoreszenz, die von einem Reportermolekül erzeugt wird und mit dem Fortschreiten der Reaktion zunimmt. Das Reportermolekül ist eine doppelt markierte DNA-Sonde, die spezifisch an die Zielregion der Erreger-DNA bindet. Das Fluoreszenzsignal nimmt zu, da der Fluoreszenzfarbstoff und der Quencher durch die Exonukleaseaktivität der Taq-DNA-Polymerase während der Amplifikation getrennt werden. Der PCR-Prozess besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA, Primer-Annealing und Synthese der komplementären Kette.
Der Zyklusschwellenwert - Ct - ist die Zykluszahl, bei der die in einer Reaktion erzeugte Fluoreszenz die Fluoreszenzschwelle überschreitet, d. h. das Fluoreszenzsignal steigt deutlich über die Hintergrundfluoreszenz an.
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