das "MOLgen DNA Treponema pallidum S1 Kit" ist ein Assay-Kit für den Nachweis von Treponema pallidumDNA mittels Echtzeit-PCR.
Einführung
das "MOLgen DNA Treponema pallidum S1 Kit" ist für den Nachweis von Treponema pallidum-DNA in klinischen Proben (Abstriche von Epithelzellen, Gewebeflüssigkeit von erosiv-ulzerativen Hautläsionen und Schleimhäuten) unter Verwendung der Methode der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) in Echtzeit mit Fluoreszenzdetektion des amplifizierten Produkts bestimmt.
Die Extraktion der DNA kann mit dem "Molgen Universal Extraction Kit" durchgeführt werden. Bei Verwendung von NA-Extraktionskits anderer Hersteller wird dringend empfohlen, eine von Adaltis S.r.l. hergestellte interne Kontrollprobe (IC) zu verwenden.
Set 1 ist für die Verwendung mit Block-PCR-Cyclern bestimmt: AMPLIlab (Adaltis), iQ5 iCycler, CFX96 (Bio-Rad, USA), DT-96 (DNA-Technology, Russland).
Set 1 enthält die erforderlichen Reagenzien für 48 Tests, einschließlich Kontrollproben.
HINWEIS:
Das Extraktionsprotokoll und das PCR-Setup-Verfahren können im automatisierten Modus mit dem Adaltis EXTRAlab Instrument durchgeführt werden, indem das in der Benutzeroberfläche des Instruments vorinstallierte Extraktions- und PCR-Setup-Protokoll ausgeführt wird.
Prinzip der Methode
Die Echtzeit-PCR basiert auf dem Nachweis der von einem Reportermolekül erzeugten Fluoreszenz, die mit dem Fortschreiten der Reaktion zunimmt. Das Reportermolekül ist eine zweifach markierte DNA-Sonde, die sich spezifisch an die Zielregion der Erreger-DNA bindet. Das Fluoreszenzsignal erhöht sich aufgrund der Trennung von Fluoreszenzfarbstoff und Quencher durch die Aktivität der Taq-DNA-Polymerase-Exonuklease während der Amplifikation. Die PCR besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA, Primer-Annealing und Synthese der komplementären Kette.
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