das "Molgen DNA MBTC Kit" ist ein Assay-Kit für den Nachweis von Mycobacterium tuberculosiscomplex DNA mittels Real-Time PCR Methode.
Einführung
das "Molgen DNA MBTC Kit" ist für den Nachweis von DNA des Mycobacterium tuberculosis-Komplexes (enthält Mykobakterien, die Tuberkulose beim Menschen verursachen: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. Africanum), die aus klinischen Proben extrahiert wurde, unter Verwendung der Methode der Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit Fluoreszenznachweis des amplifizierten Produkts.
das "Molgen DNA MBTC Kit" ist für die Verwendung mit den Blockcyclern iQ5 iCycler, CFX96 (Bio-Rad, USA), DT96 (DNA-Technology, Russland) konzipiert.
Das Assay-Kit kann in der klinischen Praxis zur Untersuchung von klinischem Material (Blutplasma, Biopsiematerial, Liquor, Urin, bronchopulmonale Lavage, Sputum, Synovialflüssigkeit) verwendet werden.
Die Extraktion der DNA kann mit dem Extraktionskit der MOLgen-Serie (hergestellt von Adaltis) durchgeführt werden. Bei Verwendung von NA-Extraktionskits anderer Hersteller wird dringend empfohlen, eine von Adaltis hergestellte interne Kontrollprobe (IC) zu verwenden.
das "Molgen DNA MBTC Kit" enthält Reagenzien für 96 Tests, einschließlich Kontrollproben.
Prinzip der Methode
Die Echtzeit-PCR basiert auf dem Nachweis der von einem Reportermolekül erzeugten Fluoreszenz, die mit dem Fortschreiten der Reaktion zunimmt. Das Reportermolekül ist eine zweifach markierte DNA-Sonde, die sich spezifisch an die Zielregion der Erreger-DNA bindet. Das Fluoreszenzsignal erhöht sich aufgrund der Trennung von Fluoreszenzfarbstoff und Quencher durch die Taq-DNA-Polymerase-Exonukleaseaktivität während der Amplifikation. Die PCR besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA, Primer-Annealing und Synthese der komplementären Kette.
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