Enzymimmunoassay (ELISA) der dritten Generation für die qualitative Bestimmung von IgG-Antikörpern gegen das Hepatitis-E-Virus in menschlichem Plasma und Seren. Das Kit kann für das Screening von Blutkonserven und die Nachuntersuchung von HEV-infizierten Patienten verwendet werden. Nur für die "in vitro"-Diagnostik geeignet.
Einführung
Das Hepatitis-E-Virus (HEV) ist ein kürzlich entdeckter Erreger der enterisch übertragenen viralen Hepatitis. HEV ist ein unbehülltes Einzelstrang-RNA-Virus, das strukturell dem Calicivirus ähnelt und im Stuhl von infizierten Patienten gefunden wird.
HEV ist in vielen Entwicklungsländern ein ernstes Problem, und der erste Ausbruch wurde 1955 in Neu-Delhi, Indien, gemeldet. Hepatitis E wurde nie mit einer chronischen Infektion in Verbindung gebracht; allerdings wurde bei schwangeren Frauen eine hohe Sterblichkeitsrate festgestellt.
Das Klonen und die Sequenzierung des HEV-Genoms haben zur Entwicklung serologischer Tests für den Nachweis von Anti-HEV-Antikörpern geführt.
Diese Tests beruhen auf synthetischen immundominanten Antigenen, die aus konservativen Regionen des Virus stammen.
Prinzip der Methode
Mikrotiterplatten werden mit HEV-spezifischen synthetischen Antigenen beschichtet, die für konservative und immundominante Determinanten aus ORF2 und ORF3 aller 4 Subtypen kodieren.
Die feste Phase wird zunächst mit der verdünnten Probe behandelt, und Anti-HEV-IgG werden, falls vorhanden, von den Antigenen eingefangen.
Nach dem Auswaschen aller anderen Bestandteile der Probe werden in der zweiten Inkubation gebundene Anti-HEV-IgG durch Zugabe polyklonaler spezifischer Anti-HEV-IgG-Antikörper, die mit Peroxidase (HRP) markiert sind, nachgewiesen.
Das Enzym wird an die feste Phase gebunden und wirkt auf die Substratmischung ein,
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