Enzymimmunoassay (ELISA) zur quantitativen/qualitativen Bestimmung von IgG-Antikörpern gegen das Rötelnvirus in menschlichem Plasma und Seren. Nur für den Forschungsgebrauch.
Einführung
Das Rötelnvirus ist ein kleines, kugelförmiges, umhülltes Virus mit einem Durchmesser von 55-60 nm und ist das einzige Mitglied der Gattung Rubivirus aus der Familie der Togaviridiae.
Das Virus enthält ein einzelsträngiges 42s-RNA-Molekül, und es ist nur ein Serotyp bekannt. Das Virus kodiert für mindestens drei Hüllglykoproteine, E1, E2a, E2b, ein Nukleokapsid-assoziiertes Protein, C, und zwei Nichtstrukturproteine.
Der Nachweis von Röteln-spezifischen IgG- und IgM-Antikörpern ist für die serologische Diagnose sowohl von kongenitalen als auch von primären postnatalen Rötelninfektionen sehr wichtig, da sie zu schweren Geburtsschäden führen können.
Das Fehlen von Röteln-spezifischen IgG-Antikörpern in Seren, die typischerweise über einen längeren Zeitraum nach Primärinfektionen vorhanden sind, und das Vorhandensein von virusspezifischen IgM-Antikörpern sind ein Hinweis auf das Risiko von Defekten bei Neugeborenen. Hochspezifische Röteln-IgG-Tests bieten dem Kliniker einen hilfreichen und zuverlässigen Test für die Überwachung dieser Risiken in der Schwangerschaft und für die Überwachung der immunologischen Reaktion nach der Impfung.
Prinzip der Methode
Mikrotiterplatten werden mit nativen Rötelnviren beschichtet, die durch Saccharosegradientenzentrifugation hoch gereinigt und inaktiviert wurden.
Die feste Phase wird zunächst mit der verdünnten Probe behandelt, und die IgG gegen das Rötelnvirus werden, falls vorhanden, von den Antigenen eingefangen.
Nach Auswaschen aller anderen Bestandteile der Probe werden in der zweiten Inkubation gebundene Anti-Röteln-IgG durch Zugabe von polyklonalen spezifischen Anti-HIgG-Antikörpern, die mit Peroxidase (HRP) markiert sind, nachgewiesen.
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