Aktives rekombinantes humanes IL-1 beta-Protein wird mit dem E. coli-Expressionssystem hergestellt. Das Zielprotein wird mit der Sequenz (Ala117-Ser269) von humanem IL-1 beta (Accession #NP_000567.1) exprimiert, die mit einem initialen Met am N-Terminus und einem 6×His-Tag am C-Terminus fusioniert ist.
Bio-Aktivität
1.Das rekombinante humane IL1β-Protein wurde mittels NF-κB-Reporter-Assay in HEK293-Zellen gemessen. Die ED50 für diesen Effekt liegt bei 1-10 pg/mL.
2.Gemessen in einem Zellproliferationsassay mit D10.G4.1 Maus-Helfer-T-Zellen. Die ED50 für diese Wirkung liegt bei 0,217-0,870 ng/mL.
3.Gemessen an seiner Bindungsfähigkeit in einem funktionellen ELISA. Immobilisiertes Human-IL-1 beta (Katalog: RP00002) in einer Konzentration von 10 μg/mL (100 μL/Vertiefung) kann biotinyliertes Human-IL-1R1 (Katalog: RP01036) mit einem linearen Bereich von 0,002-1 μg/mL binden.
Hintergrund
Interleukin-1 beta (IL1 beta oder IL1B), auch bekannt als Catabolin, gehört zur Familie der Interleukin-1-Zytokine und wird von aktivierten Makrophagen als Proprotein produziert, das durch Caspase 1 (CASP1/ICE) zu seiner aktiven Form proteolytisch verarbeitet wird. Dieses Zytokin ist ein wichtiger Vermittler der Entzündungsreaktion und ist an einer Vielzahl von zellulären Aktivitäten beteiligt, einschließlich Zellproliferation, Differenzierung und Apoptose. Die Induktion der Cyclooxygenase-2 (PTGS2/COX2) durch dieses Zytokin im zentralen Nervensystem (ZNS) trägt zur entzündlichen Schmerzüberempfindlichkeit bei.
Gebrauchsanweisung
Rekonstitution
In einer Konzentration von 0,1-0,5 mg/ml in sterilem destilliertem Wasser rekonstituieren.
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